萌新求问，Rt-PCR，qPCR，PCR的区别与不同是什么？ - 知乎
qPCR 指荧光实时定量 PCR （Quantitative real-time PCR），有时也会被称作实时/定量 PCR （rtPCR）。qPCR 使用一种特殊的探针—— Taqman 探针，其结构为一个 RNA 探针，两端分别加 …
能讲解一下ChIP qPCR实验的详细步骤吗? - 知乎
ChIP的标志之一是通过qPCR定量纯化的DNA产物的能力。 需要以解交联和纯化后2%的Input DNA（不稀释）、目的蛋白抗体IP后的DNA、IgG抗体IP后的DNA分别作为模板（各取未稀释的DNA 2ul）， …
转录组测序完成后，qpcr引物该怎么设计啊，有没有推荐的教学视频?
常规qPCR的扩增片段长度，建议控制在80到200 bp之间。 片段短一点，扩增效率会更高，能避免因为片段太长导致扩增不彻底的问题。 另外，要避开基因的可变剪接区域，如果是研究特定转录本，就得 …
测qpcr的样品混合好后，可以4度冰箱保存12小时再去上机测吗？
测qpcr的样品混合好后，可以4度冰箱保存12小时再去上机测吗？ 因为我没及时看暑假仪器使用时间调整，导致无法在周日上机测，但是周一就要回家了，所以想周日晚上混合样品，然后周一早上上机测， …
qPCR曲线异常什么原因？扩增曲线平台期下降？ - 知乎
在RT-qPCR的实验过程中，大家或多或少都会遇到扩增曲线异常、熔解曲线异常、重复性差等问题。 给大家整理了SYBR Green染料法的常见问题及解决方案，以供大家参考。 Part 1 扩增曲线异常 正常 …
qPCR绝对定量如何构建标准曲线？ - 知乎
图1. qPCR绝对定量技术实验流程图 二、qPCR绝对定量标准曲线构建 在上一部分我们介绍了qPCR绝对定量的核心原理是通过构建已知浓度的标准曲线来确定未知样品中靶基因的确切拷贝数。
实时荧光定量PCR（RT-qPCR）
RT-qPCR原理的三个主要步骤： 1 反转录： 使用逆转录酶和特定引物将RNA样品反转录成cDNA。 该步骤将RNA模板转化为更稳定且可扩增的DNA形式。 反转录过程中使用特定引物。 2 PCR扩增： 使用 …
荧光定量PCR是用来干什么的？ - 知乎
1.qPCR试剂盒 按照MIQE要求，我们必须在文章中清楚的描述完整的反应条件，包括PCR的反应体系配置，用的什么试剂盒，制造商是谁，多大的反应体系，用的是染料法还是探针法。 事情并非仅仅描 …
如何针对一个基因的不同剪切设计特异性qPCR引物？ - 知乎
前向引物：位于外显子3的特异性区域。 反向引物：跨越外显子3和4的剪接点。 引物序列 前向引物：5’-AGCTGCTGCTGCTGCTGCTG-3’ 反向引物：5’-TGCTGCTGCTGCTGCTGCTG-3’ 通过以上步骤和 …
教程| 一个视频学会你qPCR实验，超详细！ - 知乎
Jun 16, 2021 · 实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)/qRT-PCR，是指在PCR反应体系中加入荧光标记物，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析 …